существует ли альтернатива пробе Манту
Статья на конкурс «био/мол/текст»: Несмотря на стремительное развитие медицины, туберкулез не спешит сдавать свои позиции, оставаясь не только актуальным и смертоносным, но и трудно диагностируемым заболеванием. А ведь своевременная диагностика — это возможность снизить количество больных активными формами и повлиять на распространение инфекции! Традиционно для диагностики туберкулеза применяют пробу Манту 2 ТЕ. Тем не менее в последние годы появились альтернативные методы — «Диаскинтест» и анализ крови IGRA (Interferon Gamma Release Assay). Что это за тесты и в состоянии ли они полностью заменить «старушку» пробу Манту, которой недавно исполнилось 110 лет?
Эта работа опубликована в номинации «Биофармацевтика» конкурса «био/мол/текст»-2018.
Партнер номинации — медицинская компания «Инвитро».
Генеральный спонсор конкурса — компания «Диаэм»: крупнейший поставщик оборудования, реагентов и расходных материалов для биологических исследований и производств.
Спонсором приза зрительских симпатий выступил медико-генетический центр Genotek.
«Книжный» спонсор конкурса — «Альпина нон-фикшн»
Проблема лечения и диагностики туберкулеза до сих пор остается чрезвычайно актуальной. И дело не только в том, что палочка Коха (Mycobacterium tuberculosis) развивает поразительную устойчивость к антибиотикам: ситуацию осложняет еще и длительный инкубационный период заболевания. Фактически, мы имеем дело с возбудителем, носители которого могут долгое время быть совершенно здоровы! В придачу, существуют не только активные формы туберкулеза, но и латентное носительство. А предсказать, перейдет ли оно в активную форму и когда это случится, чрезвычайно трудно. Однако не все так плохо, потому что даже латентное носительство можно диагностировать и в случае необходимости пролечить. Вопрос лишь в том, что до сих пор не разработано точного и эффективного метода диагностики туберкулезных процессов. Поэтому долгие годы ученые пытаются разработать «идеальный» тест, который позволил бы отличить туберкулез от постпрививочного иммунитета и латентного носительства, имел бы низкую себестоимость и не зависел от человеческого фактора.
Тем не менее диагностика — это еще не диагноз, и результат любого теста не является истиной в последней инстанции. Диагноз же по-прежнему ставят, исходя из нескольких составляющих:
- клинической картины;
- рентгенографии легких, флюорографии или компьютерной томографии;
- результатов диагностических тестов.
Однако большинство этих методов диагностируют туберкулез постфактум — только скрининговые тесты помогают выделить лиц с высоким риском развития заболевания или с только зарождающимся процессом. И уже более 100 лет основным методом массовой диагностики туберкулеза является туберкулиновая проба Манту 2 ТЕ (содержащая 2 туберкулиновые единицы). Тест спорный, со множеством ложноположительных результатов, но именно его используют во всем мире и отказываться пока не собираются.
Проба Манту
Проба Манту 2 ТЕ — это специфический кожный тест на основе туберкулина.
Смысл этой пробы в том, что организм человека, зараженного микобактерией туберкулеза, будет реагировать на введение ее частичек выработкой Т-лимфоцитов [3]. Если же человек здоров, подобной реакции не будет. Однако тут есть одно но: антигены, входящие в состав туберкулина, характерны не только для палочки Коха
В мире используют 3 вида туберкулина (рис. 1): датский препарат PPD (purified protein derivative) RT 23, американский PPD-S и российский — PPD-L. Различаются они видами микобактерий, из которых были получены: при производстве датского и американского препаратов используют только M. tuberculosis, а при производстве российского — смесь из M. tuberculosis и M. bovis (микобактерии, вызывающей туберкулез у крупного рогатого скота; на основе этого штамма была разработана вакцина БЦЖ). Различие в составах туберкулина обусловливает разные границы положительного результата: 15 мм для детей, привитых БЦЖ, и не более 10 мм для непривитых детей до 5 лет у датского препарата, не более 10 мм у американского и 5 мм у российского [4].
Рисунок 1. Препараты туберкулина
Диагностику с помощью пробы Манту проводят следующим образом: небольшое количество туберкулина вводят под кожу чуть выше запястья и через 72 часа оценивают реакцию, которую считают положительной, если в месте введения появляется припухлость (папула) более 5 мм в диаметре. В зависимости от ее размера, различают степень реакции от отрицательной (0–1 мм) до резковыраженной, или гиперергической (17 мм и более у детей и подростков, 21 мм и более у взрослых) [5]. И тут начинаются трудности, потому что у привитых БЦЖ реакция Манту положительна [6]! Мало того, чем больше поствакцинальный рубец, тем выше чувствительность к туберкулину [7]. Поэтому у привитых БЦЖ оценивают не только диаметр папулы, но и размер поствакцинального рубчика (табл. 1).
Срок, прошедший с момента вакцинации БЦЖ | Размер рубчика после БЦЖ | Привитый иммунитет (мм) | Неясная причина | Подозрение на инфицирование |
---|---|---|---|---|
1 год | 6–10 мм | 5–15 мм | 16 мм | Более 17 мм |
2–5 мм | 5–11 мм | 12–15 мм | Более 16 мм | |
0 мм | 2–4 мм | 5–11 мм | Более 12 мм | |
2 года | Вне зависимости от размера | Уменьшение размера папулы или прежний ее размер | Увеличение размера на 2–5 мм от предыдущего положительного результата | Реакция изменяется на положительную или папула увеличивается более чем на 5 мм |
3–5 лет | Вне зависимости от размера | 5–8 мм либо уменьшение размера папулы | Увеличение размера на 2–5 мм за последний год или отсутствие тенденции к уменьшению | Изменение на положительную (5 мм) реакцию или увеличение папулы на 6 мм; 12 мм при впервые поставленной пробе; изменение предыдущего размера на 2–4 мм или размер в 12 мм |
6–7 лет | Вне зависимости от размера | 0–4 мм | 5 мм | 6 мм и более |
7–9 лет | Если в 7 лет ребенку была сделана ревакцинация БЦЖ, реакция Манту вновь становится положительной и нормы повторяются | 5 мм | 6 мм и более | |
Взрослые | Отрицательная реакция, покраснение любого диаметра; папула до 4 мм | Более 5 мм |
Безусловно, метод оценки результата довольно субъективный. Но главное, папулу надо еще правильно измерить, зафиксировав только размер выпуклой части и игнорируя покраснение вокруг нее (рис. 2).
Рисунок 2. Правильная и неправильная оценки диаметра папулы
Впрочем, основной недостаток пробы Манту не в этом: проблема в том, что с ее помощью трудно отличить поствакцинальный иммунитет от заболевания, а цена ошибки — «ненужный» курс антибиотиков. Поэтому чаще всего ее результат — это только первый шаг, лишь
Еще одна трудность с диагностическими возможностями пробы Манту связана с тем, что они зависят от нижней границы положительного результата: чем ниже граница, тем больше будет наблюдаться ложноположительных реакций. К примеру, в России пороговым значением является папула в 5 мм. Это приводит к гипердиагностике — большому количеству зафиксированных реакций, но в итоге к низкому проценту реально выявленных случаев инфицирования [4].
В общем, не удивительно, что в последнее время информативность туберкулиновой пробы постоянно ставится под сомнение. Мало того, она может вызывать не связанные с туберкулезом аллергические реакции, поэтому все больше здоровых, но склонных к аллергии детей вынуждены идти в тубдиспансер в надежде выяснить причину положительной реакции. И наконец, на результат пробы может влиять множество факторов: недавно перенесенные инфекции, хронические заболевания, прием медикаментов, изменение гормонального фона или иммунитет к нетуберкулезным микобактериям [7].
Если говорить о достоинствах пробы Манту, то кроме низкой себестоимости, ими будут возможность выявления туберкулеза на ранних стадиях развития (за исключением лиц с иммуносупрессией и маленьких детей до двух лет [7]) и более высокая диагностическая ценность у непривитых БЦЖ по сравнению с привитыми (от 50% и ниже против 65,4% [6], [9]).
Мифы о пробе Манту
- Туберкулин вреден для здоровья, потому что инактивированные микобактерии вызывают аллергию и «нагружают иммунитет». Здесь есть небольшая доля правды: как препарат, туберкулин может вызывать аллергические реакции, не связанные с инфицированием, однако ни о какой «нагрузке» не может быть и речи, хотя бы потому что на него не вырабатываются антитела.
- Проба Манту 2 ТЕ токсична, так как препарат содержит фенол. В туберкулиновой пробе фенол является консервантом, подавляющим рост бактерий и грибков [5]. При этом его количество настолько мало (0,00025 г), что не может оказать влияние на здоровье. Фенол является продуктом метаболизма бактерий, населяющих наш кишечник, поэтому он образуется в тканях организма, попадает в кровь и выводится с мочой. Ежедневно выводится примерно 0,1–0,15 г фенола, что во много раз превышает количество, содержащееся в препарате для пробы Манту.
- Пробу Манту делают только в странах третьего мира. Это неправда: туберкулиновый тест делают во всем мире, включая США, Канаду, Германию, Данию и Нидерланды. Однако, из-за низкой заболеваемости в этих странах, туберкулинодиагностику обычно проводят только группам риска.
«Диаскинтест»
Наука, однако, не стоит на месте, и альтернативы пробе Манту существуют. Вопрос лишь в том, насколько они альтернативны. После расшифровки в 1998 году генома M. tuberculosis появилась возможность разработать абсолютно новые тесты: отечественную кожную пробу «Диаскинтест» и анализы крови IGRA. Однако на роль теста-заменителя пробы Манту больше всех претендует именно «Диаскинтест».
По сравнению с туберкулиновой пробой «Диаскинтест» — это большой шаг вперед. И все потому, что в его состав входит не сотня антигенов, а только рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 в стандартном разведении, который не реагирует ни на вакцинный штамм M. bovis, ни на большинство непатогенных микобактерий, — в основном он чувствителен только к палочке Коха. Иными словами, для диагностики инфекции можно использовать лишь этот белок, который показывает наличие или отсутствие клеточного иммунитета к M. tuberculosis. «Диаскинтест» вводят внутрикожно и проверяют результат через 72 часа.
Рисунок 3. Антигены ESAT-6 и CFP-10
В геноме M. tuberculosis белки ESAT-6 и CFP-10 закодированы в зоне RD1. Они экспрессируются при размножении микобактерии и связаны с ее вирулентностью, поэтому иммунный ответ на эти белки отражает активность инфекционного процесса [10]. В составе «Диаскинтеста» они представлены в виде рекомбинантного белка из двух связанных антигенов ESAT6 и CFP10 (рис. 3), синтезируемых генетически модифицированной культурой бактерий Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT [6]. По похожей технологии был получен еще один препарат — датский C-Tb, однако в нем другое соотношение ESAT-6 и CFP-10, и он менее чувствителен по сравнению с российской разработкой [4].
Благодаря тому, что в состав «Диаскинтеста» входит не коктейль из полисахаридов, липидов и белков, а только синтетический антиген плюс вспомогательные вещества (фенол, натрия хлорид, «Твин-80»), он является более высокоспецифичным, чем препарат для пробы Манту. То есть при его применении фиксируется меньше ложноположительных результатов, а также аллергических реакций неинфекционного характера [2].
Что касается оценки активности туберкулезного процесса, то в этом «Диаскинтест» на голову опережает конкурентов, потому что для него разработана градация положительного результата (табл. 2). То есть чем больше возбудителя в организме, тем больший размер будет иметь папула. А это значит, что у большинства туберкулезных больных реакция на этот тест более выражена, чем у латентных носителей (единственное, здесь снова имеет место субъективная оценка результата). Прибавим к этому то, что «Диаскинтест» позволяет выявлять носителей с высоким риском развития туберкулеза и снижать количество необоснованной терапии [11], а также снижение выраженности реакции на него у больных, получающих курс антибиотиков [4], и получим весьма ценное конкурентное преимущество перед туберкулиновой пробой.
Реакция | Размер гиперемии и папулы |
---|---|
Отрицательная | Нет папулы и/или гиперемии, «укольчитая реакция» до 2 мм |
Сомнительная | Наличие гиперемии при отсутствии папулы |
Положительная: | Папула любого размера: |
— слабовыраженная положительная реакция | До 5 мм |
— умеренно выраженная реакция | 5–9 мм |
— выраженная реакция | 10–14 мм |
— гиперергическая реакция | 15 мм и более, а также при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата |
Однако и у «Диаскинтеста» есть недостатки:
- Он не чувствителен к M. bovis и, следовательно, не может диагностировать туберкулезный процесс, вызванный этим видом микобактерии. Конечно, число подобных случаев невелико, но все-таки это снижает эффективность теста.
- Согласно исследованиям, у «Диаскинтеста» достаточно высокая чувствительность в выявлении туберкулезной инфекции как у детей — 90–96,7%, так и у взрослых — 78–81,5% [2]. Тем не менее остаются приблизительно 10–20% случаев, которые он пропускает.
- «Диаскинтест» может быть отрицательным у туберкулезных больных с выраженными нарушениями работы иммунной системы из-за тяжелого течения болезни, а также у ВИЧ-инфицированных (в этом случае чувствительность теста зависит от уровня Т-лимфоцитов CD4+ [2]).
Что нужно знать о кожных пробах?
- Препарат для пробы Манту 2 ТЕ и «Диаскинтест» — маркеры туберкулезной аллергии, то есть они являются «аллергенами». Туберкулезная аллергия связана с иммунным ответом на M. tuberculosis, который делает организм чувствительным (сенсибилизированным) даже к малому количеству микобактерии. С помощью кожных тестов, содержащих раздражающий фактор (инактивированные частицы палочки Коха), этот процесс можно зафиксировать. Инфекционная аллергия является реакцией замедленного типа, поэтому результат проб оценивают не сразу, а через 72 часа.
- Кожная реакция на эти пробы является маркером Т-зависимого иммунного ответа, в котором задействованы Т-клетки CD4+ и CD8+ и ассоциированные с ними провоспалительные цитокины, IFNγ, TNF и т.д. Поэтому кожные тесты чувствительны в том числе и к латентному носительству, когда количество микобактерии крайне мало [4], [6].
- Как видно из таблиц 1 и 2, результаты кожных проб наблюдают в динамике, при необходимости сравнивая между собой значения предыдущих лет. Поэтому нет смысла делать диагностику туберкулеза, что называется «для галочки»: только для медкарты в детский сад или в школу — ее нужно проводить ежегодно (или хотя бы раз в два года).
- В трактовке результатов кожных проб существует понятие виража — резкое увеличение диаметра папулы на шесть и более миллиметров по сравнению с предыдущей пробой. Кроме этого, виражом считают не связанный с вакцинацией БЦЖ переход отрицательной реакции в положительную. Вираж пробы Манту не всегда означает инфицирование (он может быть и аллергического характера), однако для уточнения ситуации обычно назначают дополнительное обследование и консультацию фтизиатра.
Что выбрать: пробу Манту или «Диаскинтест»?
Если сравнивать диагностическую эффективность тестов, то «Диаскинтест» дает значительную фору туберкулиновой пробе. Тем не менее среди фтизиатров есть адепты как пробы Манту, так и «Диаскинтеста». Впрочем, сравнительные исследования говорят не в пользу проб с туберкулином — ведь реакция на них еще не означает заболевания или заражения микобактерией. Плюс массовая вакцинация БЦЖ резко снижает их диагностические способности [6].
В качестве примера можно привести отечественное исследование, в котором сравнивали результаты кожных проб [6]. Оказалось, что у подростков, живших в близком контакте с больными открытой формой туберкулеза (бактериовыделителями), положительные реакции на введение туберкулина наблюдались в 77,9% случаев, заболевание же было выявлено только у 4,9%. При этом положительные реакции на «Диаскинтест» отметили лишь у 5,6%, из которых в 62,5% случаев выявили туберкулез [6]. По оценкам российских ученых, результативность «Диаскинтеста» в выявлении активного туберкулеза может превышать результативность пробы Манту 2 ТЕ в 40 раз (табл. 3) [11]!
Результат пробы Манту | Результат «Диаскинтеста» | |
---|---|---|
В норме: | ||
у непривитых БЦЖ | Отрицательный | Отрицательный |
у привитых БЦЖ | Слабоположительный или положительный без гиперергии | Отрицательный |
При заражении: | ||
у непривитых БЦЖ | Положительный | Слабовыраженный или положительный в зависимости от активности процесса* |
у привитых БЦЖ | Резко положительный | Слабовыраженный или положительный в зависимости от активности процесса* |
* Не учитывается ситуация (10–20% случаев), когда результат «Диаскинтеста» ложноотрицательный. |
Анализы крови на туберкулез: плюсы и минусы
Открытие специфичных для M. tuberculosis антигенов позволило разработать лабораторные тесты для диагностики туберкулеза. Это широко известные анализы IGRA (Interferon-Gamma Release Assays), к которым относятся T-SPOT®.TB и QuantiFERON-TB Gold In-Tub («Квантиферон»).
Технология их проведения довольно проста: у пациента берут венозную кровь, смешивают ее с белками ESAT-6, CFP-10 и TB 7.7, после чего наблюдают за реакцией. То есть за количеством Т-лимфоцитов (T-SPOT®.TB) или гамма-интерферона («Квантиферон») [12].
Многие необоснованно считают эти тесты «золотым стандартом» диагностики туберкулеза и его латентных форм, хотя их результаты могут лишь косвенно свидетельствовать об активной инфекции микобактерией или о носительстве — процессах, которые IGRA-анализы не различают [12]. И если ориентироваться на руководства ВОЗ, а также Европейского центра по контролю и профилактике заболеваний (ECDC), «золотых стандартов» в диагностике латентных форм туберкулеза не существует в принципе. Как не существует и адекватной модели латентной туберкулезной инфекции. Поэтому для оценки границ результатов IGRA-анализов приходится использовать так называемые «суррогаты» — показания людей с подтвержденным активным туберкулезом [12]. А это только усложняет ситуацию, потому что у больных туберкулезом снижен клеточный иммунитет, и их показатели не могут служить основой для оценки диагностики латентной инфекции [6].
Вдобавок, отрицательный результат IGRA-анализов крови, не является гарантией отсутствия заболевания; от ложных результатов они тоже не застрахованы. Например, при тестировании «Квантифероном» ложноотрицательные результаты возможны:
- в ранние сроки инфицирования;
- при иммунодефицитных состояниях;
- при неправильном заборе крови или ее транспортировке;
- из-за ошибок во время расшифровки результатов.
Добавлю, что тесты IGRA требуют наличия качественного оборудования, специальных реактивов и квалифицированного персонала, поэтому себестоимость у них довольно высока.
Кроме того, по сравнению с кожными тестами существенным недостатком этих анализов является определение in vitro только образования гамма-интерферона или активности Т-клеток. Поэтому в странах с высокой заболеваемостью (а Россия, несомненно, в их числе с показателем более 50 больных на 100 000 населения [13]) у IGRA-анализов нет никаких дополнительных преимуществ [12]. Тем более что их способность диагностировать туберкулезный процесс колеблется в районе 42–90% для разных возрастных групп, к тому же они не маркируют латентное носительство [12]. Другими словами, для жителей нашей страны анализы крови на туберкулез в общем-то напрасная трата денег, хотя в странах с низкой заболеваемостью (США, Канада, Западная Европа) они более информативны и рекомендованы к замене туберкулиновых проб для привитых БЦЖ [14].
В мире живет более полумиллиарда латентных носителей M. tuberculosis. Причем, далеко не каждый из них в итоге заболевает, потому что размножение микобактерии сдерживает иммунная система. Например, из 100 инфицированных палочкой Коха детей, лишь у одного развивается активная форма туберкулеза, поэтому диагностические тесты направлены не только на выявление латентных носителей, но и на оценку риска развития заболевания [15].
Анализы крови vs кожные тесты: сравнение эффективности
При оценке эффективности тестов для диагностики туберкулеза чаще всего учитывают два параметра: чувствительность (sensitivity) и специфичность (specificity). Под чувствительностью понимают способность метода выявлять лиц с заболеванием или носителей с высоким риском развития туберкулеза. Под специфичностью — способность теста правильно идентифицировать людей, у которых нет туберкулеза (то есть этот параметр характеризует риск появления ошибочных ложноположительных результатов) [12].
Согласно исследованиям, у анализов крови IGRA достаточно высокая специфичность, но проблемы с чувствительность (табл. 4), поэтому они не могут стать основным инструментом в диагностике туберкулеза, особенно в странах с высокой заболеваемостью. Что касается «Диаскинтеста», то если верить отечественным публикациям [4], [6], [10], [11], он обладает и высокой специфичностью, и высокой чувствительностью (табл. 4). Чудо, а не тест! Однако высокая чувствительность не равняется абсолютной, поэтому и у «Диаскинтеста» случаются «проколы» в виде ложных результатов (чаще всего они наблюдается у детей до двух лет или у лиц с сопутствующими тяжелыми заболеваниями [11]).
«Квантиферон» [12] | T-SPOT®.TB [12] | Проба Манту [12] | «Диаскинтест» [2] | |
---|---|---|---|---|
Общая чувствительность | 80%* | 81%** | 65%*** | 93,3% |
Общая специфичность | 79% | 59% | 75% | 93,7% |
* Общая чувствительность 81% (95% CI 78–84%) для пациентов с подтвержденным туберкулезом. ** Общая чувствительность 92% (95% CI 90–93%) для пациентов с подтвержденным туберкулезом. *** Общая чувствительность 68% (95% CI 63–72%) для пациентов с подтвержденным туберкулезом. CI — confidence interval, доверительный интервал. |
В общем, анализы крови вряд ли смогут полностью заменить собой пробу Манту 2 ТЕ (и тем более «Диаскинтест», если речь идет об РФ). Но, быть может, они могут стать одним из дополнительных инструментов в диагностике активной туберкулезной инфекции? Да, такая возможность существует, но и здесь есть оговорки. Например, для пациентов с внелегочным туберкулезом, ВИЧ-инфицированных или детей старше пяти лет их можно рассматривать в качестве дополнительного метода. Однако в настоящее время существует ограниченное количество исследований этих тестов [12], поэтому далеко идущие выводы делать рано (табл. 5).
Проба Манту [12] | «Квантиферон» [12] | T-SPOT®.TB [12] | «Диаскинтест» | |
---|---|---|---|---|
Специфичность | 89,4% | 85,8% | 84% | 86,3% [2] |
Чувствительность | 65,4% | 79,9% | 42,2% | 90,5–96,7% [2] |
94,8 [11] |
Какой тест все-таки выбрать?
Как говорится, при всем богатстве выбора альтернатив немного. К сожалению, при выборе теста многие руководствуются не его диагностическими характеристиками, а безвредностью для здоровья, потому что фенол в составе кожных проб пугает многих. И существует даже движение против пробы Манту, группа поддержки которого периодически предлагает заменить ее анализами крови IGRA. Но, как было отмечено выше, у подобных страхов нет никаких оснований. В придачу, являясь продуктом жизнедеятельности организма, фенол не накапливается, а выводится вместе с мочой. Поэтому главными критериями все-таки являются чувствительность и специфичность тестов.
На данный момент, наилучшие характеристики демонстрирует только «Диаскинтест». Однако, несмотря на это, в массовой диагностике продолжают использовать пробу Манту 2 ТЕ, и она вполне удовлетворяет фтизиатров. Ведь «Диаскинтест» (также как и IGRA-анализы) не реагирует на инфекцию, вызванную M. bovis. Кроме того, его внедрили в массовую диагностику лишь 10 лет назад, а это слишком небольшой срок, чтобы полностью удостовериться в его диагностической эффективности и «списать» туберкулиновую пробу за ненужностью.
Что касается анализов крови IGRA, то они слишком дороги, не превосходят «Диаскинтест» в чувствительности и не различают латентное носительство. А в мире, где живет более 10 миллионов туберкулезных больных и 1,7 миллиарда носителей микобактерий [3], это является существенным недостатком.
- Нестерова Ю. (2017). «6 самых популярных тестов на туберкулез: проблема выбора». МedАboutМe;
- Корецкая Н.М. (2013). Диаскинтест: новые возможности в диагностике туберкулеза. «Медицина в Кузбассе». 4, 3–8;
- Болезнь, не думавшая сдаваться;
- Слогоцкая Л.В., Богородская Е.М., Леви Д.Т., Сельцовский П.П. (2017). 10 лет кожной пробе с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (Диаскинтест) и 110 лет туберкулиновой пробе Манту – сравнение эффективности. «БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение». 17, 67–77;
- «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации». (2003). Приказ № 109 Минздрава РФ;
- Слогоцкая Л.В. (2013). Туберкулинодиагностика и новые тесты для выявления инфекции. «Медицинский Вестник». 16, 14–15;
- Филинюк О.В., Колоколова О.В., Кабанец Н.Н. Диагностика туберкулеза у детей и подростков. Томск: СибГМУ, 2013. — 174 с.;
- Методы выявления туберкулеза у детей (методическое пособие). Москва, 1990;
- Яковлева Г.П. (2017). ДИАСКИНТЕСТ vs МАНТУ. «Туберкулезная аллергия»;
- Слогоцкая Л.В. (2014). Иммунологические тесты со специфичными для Mycobacterium tuberculosis белками ESAT-6 И CFP-10. «Туберкулез и болезни легких». 1;
- Слогоцкая Л.В., Сенчихина О.Ю., Никитина Г.В., Богородская Е.М. (2015). Эффективность кожного теста с аллергеном туберкулезным рекомбинантным при выявлении туберкулеза у детей и подростков Москвы в 2013 г. «Педиатрическая фармакология». 12, 99-103;
- ECDC guidance: Use of interferon-gamma release assays in support of TB diagnosis. Stockholm: ECDC, 2011. — 32 p.;
- Нечаева О.Б. (2016). Эпидемическая ситуация по туберкулезу в России. ЦНИИ ОИЗ;
- Testing in BCG-vaccinated persons. (2016). CDC;
- Аксенова В.А. и Леви Д.Т. (2012). Туберкулез у детей и подростков. «БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение». 1, 22–27.
Альтернатива Манту: чем можно заменить, аналоги
Проба Манту известна каждому родителю. Процедура считается одной из наиболее распространенных при проведении туберкулинодиагностики.
Благодаря применению знакомого всем теста, специалисты выявляют антитела к туберкулезу в составе кровяной жидкости. Несмотря на эффективность методики, родителей в последнее время все больше стал интересовать вопрос о том, существует ли альтернатива Манту.
Можно ли заменить
Не так давно всем известная проба на туберкулез стала подвергаться постоянной критике. Это связано с различными мифами. Большинство людей пугает, что в прививке присутствует такой компонент, как туберкулин.
Стоит отметить, что он представляет собой ослабленный возбудитель заболевания, при этом, развитие болезни не представляется возможным.Но существуют и более весомые причины, по которым родители часто отказываются от такого метода диагностики и предпочитают заменять пробу Манту на более щадящие аналоги.
В первую очередь, замена объясняется тем, что входящие в состав лекарственного средства вещества оказывают потенциально вредное воздействие на детский организм:
- Стабилизаторы способны привести к повышению концентрации эстрогенов, что может спровоцировать нарушение гормонального фона.
- Консервант фенол относится к категории токсичных веществ. Современная медицина не содержит данных о его накопительном эффекте в организме. Известно только, что при передозировке могут возникнуть проблемы с почками, сердечной и репродуктивной системой. Также под его воздействием происходит снижение иммунитета человека.
Кроме того, на пробу могут возникнуть осложнения в виде:
- незначительного повышения температуры;
- сонливости и вялости;
- отказа от приема пищи;
- отечности, высыпаний и зуда кожи.
Иногда в результате реакции Манту получают искаженные данные. Это может стать причиной неправильно выбранной тактики лечения.
Список альтернативных методов
В настоящее время специалистами разработаны методики, аналогичные Манту. Они позволяют определять наличие или отсутствие заболевания как у взрослых, так и детей.
Анализ крови
Данный способ может выступать в качестве заменителя традиционной пробы на выявление туберкулеза. Когда в организме присутствует инфекция, происходит изменение скорости, с которой эритроциты оседают в крови.
При инфицировании организма или обострении патологического процесса СОЭ, как правило, повышается. Изменениям во время заболевания подвергается также лейкоцитарная формула.
Меняться она будет исходя из стадии течения патологии:
- в период инфицирования число моноцитов и лимфоцитов уменьшается, а нейтрофилов – увеличивается;
- при активном росте формула сдвигается влево, происходит обратный в сравнении с вышеописанным процесс;
- во время разрешения СОЭ и кровяная формула нормализуются.
Анализ крови нельзя полностью заменить пробой Манту, но его можно использовать, чтобы поставить предварительный диагноз.
Диаскинтест
Введение вакцины осуществляют строго в область предплечья. При этом применяют только специальный туберкулиновый шприц. После того как сделана инъекция, происходит формирование папулы, диаметр которой не превышает 7-10 мм.
Оценивают результат по истечении трех суток. Для этого измеряют поперечный размер гиперемированного участка.
Исследование анализируют в зависимости от полученной реакции:
- положительная – присутствует инфильтрат различных размеров;
- отрицательная – покраснение и отечность в месте укола отсутствует;
- сомнительная – гиперемия кожного покрова, но при этом нет припухлости.
Диаскинтест может спровоцировать развитие побочных эффектов в виде общего недомогания и незначительного повышения температуры.
Основные противопоказания для проведения ДСТ:
- предрасположенность к аллергическим реакциям;
- наличие соматических болезней;
- эпилептические припадки;
- период карантина в дошкольных и школьных учреждениях;
- непереносимость туберкулина.
Метод не рекомендуют применять при патологиях во время обострения.
Квантифероновый тест
Это полная альтернатива пробе Манту. Методика основывается на ответной реакции иммунной системы на присутствие туберкулезной палочки. Чтобы вынести заключение относительно наличия или отсутствия инфекции в организме, исследуют концентрацию гамма-интерферона в составе крови.
Данный тест отличает максимальная точность. Даже при ослабленном иммунитете с его помощью можно выявить присутствие бактерий туберкулеза. На исследование уходит 3-10 дней.
Показания к проведению квантиферонового тестирования:
- необходимость определения наличия туберкулезных микобактерий в организме людей, входящих в группу повышенного риска;
- контакт с инфицированным человеком;
- диагностирование заболевания для садика и для школы;
- запрет на проведение диаскинтеста и пробы Манту.
Благодаря такому способу удается максимально точно интерпретировать результаты туберкулинового исследования.
ПЦР
Полимеразная цепная реакция обладает повышенной чувствительностью к патогенным возбудителям, в том числе – бактериям туберкулеза.
Суть методики заключается в исследовании человеческих выделений. Это могут быть моча, кровь, содержимое желудка или мокрота. Материал помещают в специальный раствор и анализируют в три этапа:
- специалист выделяет фрагменты ДНК;
- раствор помещают в термостат и амплифицируют полученные элементы;
- на завершающей стадии распознают ДНК инфекционного возбудителя.
Вся процедура проходит в автоматизированном режиме. По продолжительности она занимает несколько часов.
Главная отрицательная черта ПЦР-исследования – неспособность отличать мертвого возбудителя от живого.
T-SPOT
Основные преимущества такого метода:
- точность результатов до 98 процентов;
- информативность;
- отсутствие ложноположительных данных после БЦЖ.
Из отрицательных сторон можно выделить лишь то, что процедура дорогостоящая и не каждый может себе ее позволить.
Рентген
Эффективность рентгенологического обследования отмечается при развитии многих видов туберкулезного процесса. Однако недостатком такого метода считается ограничение в количестве сеансов.
Процедуру допустимо применять не более одного раза в 12 месяцев, и только по отношению к взрослым людям.Маленьким пациентам рентген показан только в крайних ситуациях, когда диагностировать патологический процесс с помощью других методик не представляется возможным. Такая альтернатива опасна для детского здоровья.
Чтобы выявить туберкулез, можно воспользоваться одним из видов рентгенологического обследования:
- рентгеноскопия – органы исследуют в момент получения дозы облучения;
- рентгенография – делают снимок на специальной пленке, далее по нему оценивают состояние легких;
- томография – позволяет получить послойное изображение органа;
- флюорография – дает возможность определить источник поражения и наличие патологии.
Последний вариант используют только в случае раннего этапа формирования болезни или в качестве профилактической меры.
Когда есть смысл менять Манту на альтернативу
Замена на аналогичное тестирование целесообразна, когда нет возможности установить наличие туберкулеза привычным способом. При выборе альтернативного варианта специалист должен исходить из состояния пациента, в особенности, если это касается детей, и возможных противопоказаний.
Возьмут ли в детский сад/школу с альтернативной пробой
Если по каким-либо причинам ребенку нельзя делать Манту и тест был заменен альтернативным методом, в детское учреждение по закону взять обязаны.При этом, врач должен выдать справку, подтверждающую, что ребенок здоров и не представляет опасности для окружающих.
Что говорит закон
Согласно российскому законодательству, прививку Манту должны делать всем пациентам до 8 лет. Только после достижения этого возраста можно применять альтернативные методы выявления туберкулезной инфекции.
Заключение
У каждого из представленных методов есть свои положительные и отрицательные стороны. Если принимать решение о замене пробы на аналог, то лучше всего использовать диаскинтест. Он показан даже детям раннего возраста.
ПредыдущаяДиагностикаПротивопоказания к проведению пробы Манту
СледующаяДиагностикаАллергическая реакция на Манту: бывает ли, что предпринять при появлении
право выбора и право отказа / Авторские материалы / Радиостанция «Вести FM» Прямой эфир/Слушать онлайн
Манту — на выбор. Знаменитый иммунный тест на выявление заражения туберкулезом, по мнению детского омбудсмена Анны Кузнецовой, не должен быть обязательным при приеме малышей в детские сады и школы. Она не призывает совсем отказываться от обследования, но тестирование может быть иным — без укола. Хотя за него придется немало заплатить. Мнения профильных врачей о ранней диагностике опасного заболевания выяснял корреспондент «Вестей ФМ» Сергей Артемов.
Споры о реакции Манту — нужна она детям или нет — идут с 2013 года, когда вышли санитарные правила. Они обязали всех детей проходить тестирование на туберкулез перед поступлением в ясли и школы. И хотя копья вокруг пуговок на предплечье ломали не сами дети, но их родители — врачи поступали, и будут поступать по своим инструкциям, говорит главный фтизиопедиатр Минздрава России, доктор медицинских наук Валентина Аксенова.
«Ситуация такая в настоящее время: все дети в возрасте до 7 лет проходят ежегодное обследование пробы Манту. После 7 лет у них более информативная проба — диаскинтест. Если родители отказываются проводить либо ту, либо другую пробу — то давайте берите кровь и используйте другие методы. Не далее, как 24 марта были утверждены на профильной комиссии Российского общества фтизиатров другие тесты — альтернативные, которые можно делать, забрав кровь у ребенка».
И тест Манту, и Диаскинтест проводятся уколом в руку. Лучше всего, если оба варианта будут работать в паре, полагает ведущий научный сотрудник Центрального НИИ туберкулеза доктор медицинских наук Марина Губкина.
«Все тесты любят сравнивать с позиции чувствительности и специфичности. Проба Манту — более чувствительная… Диаскинтест — более специфичный. Просто, традиционно в России, до появления Диаскинтеста, сложилась определенная тактика обследования детей на туберкулезную инфекцию — проведение пробы Манту ежегодно. Вот этой папулы, или пуговкой ее называют. Если она стала больше, или была отрицательная, а стала положительная, то отбирают в группу риска для дообследования с использованием рентгенологического метода».
Марина Губкина ссылается и на приказ Минздрава, который рекомендует как раз оба вида проверки.
«У нас уже есть новый нормативный документ, приказ №951, который определяет использование Диаскинтеста с 8 лет ежегодно, а пробы Манту с 12 месяцев до 7 лет включительно».
Возраст диагностических инъекций, как видно отличается. И зависит он от точности показаний, пояснила Валентина Аксенова.
«Диаскинтест имеет очень высокую специфичность. Если он положительный — на 100% надо идти к врачу. Значит в организме развивается уже вирулентная микобактерия. Это очень опасный вариант. Он требует обследования на туберкулез. Таких детей в школу допускать нельзя. Проба Манту малоспецифичная. У нее специфичность — около 40%. Она может давать ложноположительные результаты на аллергию, глистную инвазию, и много таких моментов. Особенно, если ребенок аллергик».
То есть, на практике распухшая пуговка Манту может показать и наличие туберкулезной инфекции, и очень мощный иммунитет ребенка, который тут же активно подавляет даже ослабленные микобактерии, и то, что у ребенка могут быть глисты или аллергия. А поскольку Диаскинтест выявляет только туберкулез, то маленьким детям, после прививок — его проводить бессмысленно, реакция покажет, что ребенок — якобы болен именно туберкулезом. Многие родители настроены против уколов их чадам. Они по-разному аргументируют свою позицию, говорит Валентина Аксенова.
«Они думают, что можно заразить. Раньше, когда были шприцы многоразовые — они боялись ВИЧ-инфекции, но сейчас это в прошлом. Шприцы теперь одноразовые. Плюс — они боятся, что у ребенка на введенное вещество будет аллергия. Мы таких детей знаем — у кого бывают аллергические реакции. Прежде, чем он сделает реакцию Манту — у него давным-давно будет написано в медицинской книжке, что ему противопоказана проба Манту».
В последние годы во многих странах мира распространяется другой принцип диагностики — без уколов, но с анализом крови, рассказывает Марина Губкина.
«Есть квантифероновый тест. Ребенку не вводят препараты, а забирают кровь и потом в лаборатории проводят исследования».
Квантифероновый тест использовался и в России — но лицензия на препарат истекла и теперь единственной альтернативой инъекционным тестам осталась так называемая Ти-спот-диагностика. Родители могут настаивать на ней — если они категорически против Манту. Врачи обязаны пойти им навстречу. Уже изданы клинические рекомендации такого тестирования. Одна проблема, замечает Валентина Аксенова — делается этот тест за собственные деньги и далеко не в каждом населенном пункте:
«Такой тест делается в крупных центрах. Там, где есть иммунологические лаборатории. Намного проще сделать Диаскинтест. Те же, кто против прививок и манипуляций с ребенком, пусть едут в областной центр и делают альтернативный метод».
Тесты на туберкулез через анализ крови уже стали самыми популярными в США. А вот в Германии, например, детей при поступлении в школу вообще не проверяют на эту болезнь. В России от диагностики Минздрав отказываться не намерен. Но будут внесены поправки в вакцинацию БЦЖ — первая прививка младенцам сохранится, а вот вторую в 7-летнем возрасте, скорее всего, отменят. Тогда самый точный диаскинтест можно будет использовать уже в 5 лет.
Медики подчеркивают — они не отнимают у родителей право беспокоиться за своего ребенка, ставить ему прививки, делать диагностику — или нет. Но до тех пор, пока на врачах лежит государственная ответственность за профилактику туберкулеза — в коллективы, будь то в детские сады, или в школы — потенциальных носителей инфекции они, как и прежде, не допустят.
Альтернатива Манту — описание других методов выявления туберкулёза
Последние годы в России увеличилась заболеваемость туберкулёзом. На каждые 100 000 населения регистрируется 80 случаев заболевания. Риску развития болезни подвержены дети со слабым здоровьем, взрослые с ослабленным иммунитетом и хроническими заболеваниями.
В России для массового выявления туберкулёза в детских коллективах проводится проба Манту. Однако реакция Манту имеет недостатки. Она может быть положительной не только у лиц, заболевших туберкулёзом, но и привитых от него. Кроме того, проба Манту может вызвать аллергическую реакцию у детей, страдающих аллергией. Обеспокоенные родители интересуются, существуют ли другие методы обнаружения туберкулёза, чем можно заменить Манту?
Альтернативные Манту методы выявления туберкулёза
В России с 2009 года начали использоваться новые современные способы для выявления туберкулёзной инфекции у детей и взрослых. Альтернативой пробы на реакцию Манту для детей и взрослых являются следующие методы:
- «Диаскинтест»;
- Квантифероновый тест;
- анализ крови;
- метод ПЦР.
В детском возрасте, когда проводятся массовые прививки БЦЖ, врачи сталкиваются с трудностями в постановке диагноза поствакцинальной и инфекционной реакции. В условиях массовой вакцинации проба Манту положительна практически у всех детей.
Диагностика туберкулёза с помощью «Диаскинтест»
Альтернатива Манту «Диаскинтест» – это продукт генной инженерии российских разработчиков с использованием нанотехнологий в медицине. В технологии его производства используются не убитые палочки Коха, а рекомбинантный туберкулёзный аллерген. Действие теста основано на развитии иммунной реакции.
Пробу проводят с целью диагностики туберкулёза следующим категориям лиц.
- Для уточнения диагноза у лиц после пробы Манту.
- Лицам высокой группы риска заболеваемости с учётом эпидемической обстановки.
- Лицам, направленным в тубдиспансер для дополнительного обследования.
- При дифференциальной диагностике инфекции туберкулёза и поствакцинальной реакции.
- При оценке эффективности лечения.
Педиатр направляет детей в тубдиспансер исходя из результатов туберкулиновой пробы Манту в следующих случаях:
- при первичном инфицировании туберкулёзом;
- при реакции Манту размером более 6 мм;
- при нарастании размеров папулы в течение ряда лет.
Новая технология с использованием «Диаскинтест» позволяет точно выявлять только реально больных туберкулёзом. Ранее сделанная вакцинация БЦЖ не влияет на результаты пробы «Диаскинтест». Тест рассчитан для внутрикожного введения детям по достижении 1 года и взрослым.
Методика постановки «Диаскинтест» и оценка его результатов
Пробу диаскинтестом делают в дозе 0,1 мл на внутренней поверхности предплечья строго внутрикожно с использованием туберкулинового шприца. После постановки пробы образуется белесоватого цвета папула диметром 7–10 мм. Результат пробы оценивается через 3 дня путём измерения поперечного размера участка гиперемии.
Оценка результата теста по измерению гиперемии папулы следующая.
- Реакция отрицательна, если нет покраснения и припухлости на месте папулы.
- Реакция сомнительна, если имеется гиперемия, но нет инфильтрата (припухлости папулы).
- Реакция положительна, если имеется инфильтрат любого размера.
«Диаскинтест» имеет побочные действия. Они могут проявляться в недомогании, кратковременном повышении температуры.
Кроме того, внутрикожные пробы «Диаскинтест», как и Манту, имеют противопоказания:
- аллергические реакции;
- индивидуальная непереносимость туберкулина или «Диаскинтест»;
- соматические заболевания;
- эпилепсия;
- карантин в детских коллективах.
«Диаскинтест», во время обострения хронических заболеваний, временно откладывается.
Диагностика туберкулёза с помощью анализа крови
В какой-то степени альтернативой Манту является анализ крови. Если есть туберкулёзная инфекция, то меняется не состав крови, а скорость оседания эритроцитов крови (РОЭ). В случае инфицирования или обострения туберкулёза скорость оседания эритроцитов повышена. Изменения при туберкулёзе происходят и в лейкоцитарной формуле.
Формула меняется в зависимости от стадии заболевания.
- При инфицировании увеличивается количество нейтрофилов, при этом уменьшается количество моноцитов и лимфоцитов.
- В активной фазе туберкулёзного процесса происходит сдвиг формулы влево: количество нейтрофилов уменьшаются, а лимфоцитов становится больше.
- В стадии разрешения РОЭ и формула крови приходит в норму.
Анализ крови не является специфичным для диагностики туберкулёза и тем более полной заменой пробы Манту. Однако он поможет в постановке предварительного диагноза и потребует проведения специфичных проб на туберкулёз.
Диагностика туберкулёза с помощью метода ПЦР
Аббревиатура ПЦР означает — полимеразная цепная реакция. Этот метод очень чувствительный и обнаруживает возбудителей многих заболеваний, в том числе микобактерии туберкулёза. ПЦР как альтернатива Манту чаще всего используется в диагностике внелегочных форм туберкулёза. Метод в основном применяется в диагностике инфекций, которые передаются половым путём. Для проведения метода ПЦР используются выделения человека: мокрота, слизь, кровь, эякулят, желудочное содержимое. Забранный материал помещается в физиологический раствор. Далее, материал подвергается трёхэтапному ПЦР-анализу.
- Первый этап заключается в выделении фрагментов ДНК с помощью специальной жидкости.
- На втором этапе раствор помещается в термостат и подвергается амплификации фрагментов ДНК.
- На третьем этапе происходит распознавание ДНК возбудителя инфекции.
Все этапы происходят автоматизировано по заданной программе, специфичной для каждого вида возбудителя инфекции. Постановка метода занимает несколько часов. Недостатком метода ПЦР является тот факт, что он не отличает живого возбудителя от мёртвого. На практике это означает, что уже вылеченный больной ещё может иметь в организме остатки мёртвой ткани возбудителя болезни. Пациент на самом деле здоров, но «ПЦР» выдаёт положительную реакцию. Для подтверждения инфицирования необходима постановка дополнительного серологического исследования. Метод является достоверным лишь в 50% случаев. По изложенным причинам ПЦР-исследование субъективно и не является полноценной альтернативой пробе Манту.
Диагностика туберкулёза с помощью Квантиферонового теста
Полной альтернативой Манту является Квантифероновый тест. Метод основан на получении иммунного ответа на туберкулёзную палочку. В крови определяется уровень гамма-интерферона исходя из показателей которого выносится заключение о наличии или отсутствии туберкулёза. Квантифероновый тест является очень точным и чувствительным. Даже у людей с ослабленной иммунной системой и ВИЧ-инфицированных Квантифероновый тест выявляет бактерии туберкулёза. Время исследования крови по тесту занимает от 3 до 10 дней.
Применяется Квантифероновый тест в следующих случаях:
- для выявления микобактерии туберкулёза у людей из группы риска;
- в случае контакта с больным туберкулёзом;
- для массовой диагностики туберкулёза в детских учреждениях;
- для контроля эффективности противотуберкулёзного лечения в тубдиспансерах;
- если есть противопоказания для проведения туберкулиновой пробы и «Диаскинтест».
Квантифероновый тест имеет ряд огромных преимуществ перед пробой Манту и «Диаскинтест». Прививка БЦЖ не влияет на результаты Квантиферонового теста его можно проводить, в период карантина в детских учреждениях. Благодаря Квантифероновому тесту интерпретация результата исследования на туберкулёз гораздо более объективна.
Квантифероновый тест является абсолютно безопасным и не имеет совершенно никаких противопоказаний! Ведь исследование крови, взятой для теста, проводится в пробирке. Исследование этим методом широко используется в детской практике в России и за рубежом. Квантифероновый тест очень чувствительный, он выявляет микобактерии туберкулёза в 99% даже в инкубационном периоде болезни.
Диагностика туберкулёза с помощью теста Т-Спот
С 2012 года в России появилась ещё одна альтернатива Манту для выявления туберкулёза — тест Т-Спот (T-Spot.TB). Для анализа берётся кровь из вены. Это новая методика, основанная на обнаружении лейкоцитов, вырабатывающих интерферон в ответ на микобактерии туберкулёза.
Т-Спот разработан учёными Оксфордского университета и применяется для тех пациентов, кому противопоказано проведение Манту и Диаскинтеста.
Преимущества теста Т-Спот в том, что он проводится вне организма человека, в отличие от Манту не реагирует на ранее сделанную прививку БЦЖ, даёт мало ложноположительных реакций (менее 3%), обнаруживает внелегочные формы туберкулёза. Его разрешено делать аллергикам, беременным женщинам, новорождённым, лицам с иммунодефицитными состояниями.
К недостаткам Т-Спот можно отнести его высокую стоимость и то, что он не подходит для определения динамики болезни, а применим только для первичной диагностики туберкулёза. А также минусом является то, что он не входит в список процедур по ОМС, поэтому по закону медработники не вправе принимать Т-Спот вместо Манту.
В заключение напомним, что ещё до недавнего времени в массовой диагностике туберкулёза у детей и взрослых применялась только проба Манту. Диагностика этим методом имеет ряд недостатков. Реакция Манту не может давать правильный ответ у маленьких детей. Проба имеет ряд противопоказаний. При появлении же современных методов диагностики выявление туберкулёза стало намного точнее и объективнее. Квантифероновый тест является современной альтернативой пробе на реакцию Манту. Метод не имеет противопоказаний и по рекомендации ВОЗ применяется для массовой диагностики туберкулёза во всех странах мира, в том числе и в России.
До 7 лет — проба Манту, потом – Диаскинтест. Это приказ. Туберкулинодиагностика
Каждый год в детских садах, школах и детских поликлиниках детям делают пробу Манту, которая вызывает все больше вопросов у родителей. Почему «пуговка» увеличивается — или не увеличивается? Почему при «плохой» Манту ребенка непременно посылают к фтизиатру? На эти и другие вопросы в рамках VI Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы профилактики, диагностики и лечения туберкулёза у детей и подростков» ответили ведущие детские фтизиатры страны.
Зачем вообще нужна реакция Манту, если всем детям в роддоме делают прививку от туберкулеза — БЦЖ?
Цель вакцины БЦЖ — не защитить от инфицирования туберкулезом, а отграничить туберкулезный процесс на уровне лимфатической системы, если инфицирование произойдет — а оно происходит в течение жизни примерно у 70-80% населения в нашей стране. Цель БЦЖ — не дать развиться тяжелым генерализованным формам туберкулеза, не дать микобактерии туберкулеза поразить мозг, костную систему.
Этим вакцина БЦЖ отличается от остальных, которые создают в организме иммунитет против той или иной инфекции. И делают ее на 3-5-й день в роддоме потому, что в это время новорожденный еще точно не инфицирован туберкулезом. Хотя, по последним данным, делают не всем — в среднем по стране прививаются около 80% новорожденных: одни имеют противопоказания по здоровью, других отказываются прививать родители.
Реакция Манту — не прививка, хотя при этом в организм и вводится вещество туберкулин — продукт жизнедеятельности микобактерий. Проба Манту — это скрининговый (с широким охватом) метод диагностики, непременный спутник вакцины БЦЖ. По размеру и качеству папулы («пуговки») удается определить, сталкивался ли организм с микобактерией туберкулеза, что это было за столкновение — прививка БЦЖ или инфицирование туберкулезом, можно ли делать ребенку ревакцинацию БЦЖ в 7 лет или необходимо дальнейшее обследование на туберкулез.
Еще одна малоизвестная задача реакции Манту — выявление туберкулеза у взрослых. Именно для этого родителей и других родственников ребенка с «плохой» пробой Манту просят сделать флюорографию — скорее всего, он инфицирован от них. Так порой удается обнаружить туберкулез, например, у бабушки или дедушки ребенка, которые давно не проходили диспансеризацию, или у дальнего родственника, который приезжал погостить, — и таким образом остановить распространение туберкулеза.
Благодаря главному фтизиатру России и прессе мы теперь знаем, что мочить Манту можно. А откуда вообще пошла эта рекомендация, которую давали десятилетиями: не мочить Манту?
Эта рекомендация родом из тех времен, когда туберкулин вводился накожно — делалась так называемая проба Пирке. Капали капельку туберкулина, потом через эту капельку делалась насечка — верхний слой кожи, эпидермис, рассекали специальным ланцетом. Опасались, что если на раненый эпидермис попадает грязная вода, может случиться инфицирование этой ранки — гигиена в те времена оставляла желать лучшего.
После появления реакции Манту привычка «не мочить» сохранилась, хотя в ней уже не было необходимости, т.к. при постановке пробы Манту туберкулин вводится между эпидермисом и дермой, внутрикожно. И попадание чистой воды на кожу уже не играет никакой роли. Но вот травмировать — тереть, расчесывать — это место не нужно.
Почему одному моему ребенку в детском саду делают реакцию Манту, а его брату в школе — Диаскинтест?
Медицинские работники поступают в соответствии с приказом Министерства здравоохранения РФ от 21 марта 2017 г. № 124н «Об утверждении порядка и сроков проведения профилактических медицинских осмотров граждан в целях выявления туберкулеза». По этому документу детям от 1 года до 7 лет включительно диагностика туберкулеза проводится с помощью реакции Манту, у детей с 8 до 17 лет используется Диаскинтест.
Оба этих исследования относятся к туберкулинодиагностике, т.е. позволяют узнать, присутствует ли в организме туберкулин — токсин, выделяемый микобактериями. Но действующее вещество в пробе Манту — это целый «коктейль» белков, на которые многие дети сегодня дают аллергическую реакцию. Часто отличить ее от положительной реакции Манту, которая означает, что организм активно взаимодействует с возбудителем туберкулеза, может только врач-фтизиатр.
Диаскинтест — новый препарат, он появился благодаря тому, что был расшифрован геном микобактерии туберкулеза. В результате были обнаружены белки, которые отвечают именно за развитие туберкулеза и не реагируют на вакцину БЦЖ, — они и стали основой Диаскинтеста, аллергена туберкулезного рекомбинантного (это его медицинское название).
Диаскинтест — идеальный вариант с целью диагностики туберкулеза, раннего выявления детей группы риска: доступный, недорогой. Благодаря этому методу диагностики удалось снизить заболеваемость туберкулезом в последние годы. Но пока в Национальном календаре прививок присутствует ревакцинация БЦЖ в 7 лет, фтизиатры вынуждены до этого возраста делать ребенку реакцию Манту, смотреть на ее результаты от года к году и решать, нужна ему ревакцинация или нет. Только таким образом можно провести отбор детей на прививку.
Но фактически к 7 годам уже некого ревакцинировать БЦЖ: проба Манту у всех либо положительная, либо сомнительная — это подтвердило большое исследование, сделанное в Приморском крае. Такие дети не подлежат ревакцинации, и отныне им показан только Диаскинтест.
Как именно применение Диаскинтеста позволяет снижать заболеваемость туберкулезом?
Сначала несколько цифр о ситуации с туберкулезом в России. Благодаря государственным программам по борьбе с туберкулезом снижение заболеваемости и смертности сегодня идет такими темпами, которые не отмечаются ни в одной стране мира. С 2008 г. заболеваемость туберкулезом снизилась примерно на треть, смертность — более чем в 2,5 раза. За 2017 г. заболеваемость снизилась на 9,4%, а смертность — более чем на 17%.
В России разработан проект стратегии ликвидации туберкулеза к 2030 году как проблемы общественного здравоохранения. Он предполагает снижение количества больных туберкулезом до минимума, чтобы проблема перестала быть глобальной. Как этого добиться?
Туберкулез — воздушно-капельная инфекция, которая передается от взрослого к ребенку: дети, как правило, болеют бессимптомно, и их в любой стране всего 10% от всех больных туберкулезом.
Итак, туберкулезная палочка присутствует в воздухе. Она попадает в организм, происходит инфицирование, но в большинстве случаев организм справляется — вырабатывает иммунитет, и болезнь не развивается. Диаскинтест в этом случае будет отрицательным. А если он положительный, это значит, что туберкулезная палочка в организме живая, и с ней надо бороться с помощью профилактического лечения.
Если этого не сделать, может развиться туберкулезный процесс — и понадобится уже более серьезное лечение. Но в детском организме возможен и другой путь — самопроизвольное излечение, когда очаг туберкулеза отграничивается и образуется так называемый петрификат (другое название — кальцинат, т.к. вокруг пораженных тканей образуется капсула из солей кальция).
В чем опасность петрификатов? В том, что спящая микобактерия туберкулеза может проявить себя при неблагоприятных условиях — и разовьется вторичный туберкулез. Например, если ребенок заболеет какой-то другой инфекцией и его организм будет сильно ослаблен. Или во взрослом возрасте возникнет хроническое заболевание — например, язвенная болезнь, сахарный диабет. (Такие пациенты входят в группы риска по заболеванию туберкулезом и им проводят иммунодиагностику 2 раза в год.) Другие факторы риска — любое снижение иммунитета: гормональная терапия, ВИЧ-инфекция, асоциальный образ жизни.
Диаскинтест позволяет выявить живую микобактерию до того, как образуется петрификат. Свежий пример: в Ростовской области в последние несколько лет школьникам делали только Диаскинтест. Дети выросли и стали подростками — и у них не выявляют туберкулез. Всех детей из группы риска пролечили до подросткового возраста.
Возникает ощущение, что по результатам пробы Манту детей к фтизиатру направляют слишком часто. Нет ли здесь гипердиагностики?
Давайте рассмотрим весь алгоритм профилактики туберкулеза у детей в России и разберемся.
Если ребенку сделана прививка БЦЖ в роддоме, затем раз в год до 7 лет ему проводят пробу Манту. При положительной реакции Манту педиатр должен исключить аллергическую реакцию и сделать Диаскинтест. Если проба положительная, ребенка направляют к фтизиатру для дальнейшего обследования. Оно может включать: анализ крови Т-СПОТ.ТБ (также назначается вместо Диаскинтеста при аллергостатусе ребенка, ожирении), по его результатам — мультиспиральная компьютерная томография (МСКТ) органов грудной клетки, которая позволяет выявить туберкулезный процесс в легких. МСКТ также проводится у детей старше 8 лет и подростков при положительном результате Диаскинтеста.
Если ребенок не привит в роддоме, ему в течение первого года жизни должны поставить пробу Манту, и если результат отрицательный, провести вакцинацию БЦЖ. Если реакция Манту положительная — значит, ребенок уже инфицирован туберкулезом, БЦЖ ему делать нельзя, и его наблюдают дальше, проводя Диаскинтест.
Наравне с кожными пробами (реакция Манту и Диаскинтест) для детей с медицинскими противопоказаниями к туберкулинодиагностике (и при отказе от нее родителей) правомочно исследование крови Т-СПОТ.ТБ.
Все эти диагностические исследования делаются при отсутствии клинических симптомов туберкулеза у детей.
Какие симптомы могут говорить о том, что у ребенка, возможно, развивается туберкулез? На что нужно обращать внимание?
Педиатры хорошо знают эти симптомы, перечислим их для родителей. Итак, надо исключить туберкулез с помощью дополнительных исследований (неважно, сколько времени прошло от предыдущей туберкулиновой пробы) в следующих случаях:
- если ребенок получает адекватное лечение при ОРВИ, бронхите, фарингите, но улучшения не наступает в течение 7-10 дней;
- если при лечении кашля он продолжается более 2-3 недель;
- длительные проявления интоксикации: стойкое небольшое повышение температуры (субфебрильная температура), потливость ночью.
Далеко не всегда эти симптомы говорят о развитии туберкулеза, но в первую очередь надо думать о нем.
На вопросы родителей отвечали:
Валентина Александровна Аксенова, д.м.н., профессор, зав. лабораторией туберкулеза у детей и подростков ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний» Министерства здравоохранения Российской Федерации, главный детский фтизиатр;
Надежда Ивановна Клевно, д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории туберкулеза у детей и подростков ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний» Министерства здравоохранения Российской Федерации, главный внештатный специалист Центрального федерального округа по детской фтизиатрии;
Ирина Федоровна Довгалюк, д.м.н., профессор, руководитель отделения терапии легких у детей, профессор кафедры фтизиатрии МАПО, главный фтизиопедиатр Северо-Западного федерального округа;
Людмила Николаевна Мотанова, д.м.н., профессор, главный детский фтизиатр департамента здравоохранения Приморского края, профессор кафедры госпитальной терапии и инструментальной диагностики Тихоокеанского государственного медицинского университета;
Лада Анатольевна Барышникова, д.м.н., заместитель главного врача по медицинской части ГБУЗ «СОКПТД», главный детский фтизиатр Приволжского федерального округа;
Ольга Дмитриевна Баронова, к.м.н., заместитель главного врача по медицинской помощи в амбулаторных условиях ГБУЗ СК «Краевой клинический противотуберкулезный диспансер» Министерства здравоохранения Ставропольского края, главный детский фтизиатр Северо-Кавказского федерального округа;
Людмила Анатольевна Шовкун, д.м.н., профессор, зав. кафедрой туберкулеза Ростовского государственного медицинского университета, главный фтизиатр Южного федерального округа.
Подготовила Ирина Суховей
Альтернатива манту для детей по закону
Есть ли альтернатива Манту для детей, возможно ли использовать другой метод диагностики туберкулеза? Этот вопрос волнует многих родителей, т.к. зачастую проба дает положительный результат не только при наличии в организме инфекции, но и у привитых малышей. В дополнение, такой метод диагностики способен провоцировать развитие аллергии у ребенка.
Альтернатива Манту для детей существуетЧто такое проба Манту?
Туберкулез — коварная болезнь, возбудителем выступает палочка Коха или микобактерия. Выявить патологию на раннем этапе весьма сложно, поэтому основным методом диагностики является проба Манту, которую используют на протяжении последних ста лет. Но, как подтверждает практика, этот метод имеет серьезные погрешности, его результативность составляет 40%.
По закону каждому ребенку старше 1 года ежегодно должна проводиться туберкулиновая проба для своевременного выявления инфекции в организме.
Процедура подразумевает подкожное введение специального препарата — туберкулина, который представляет собой экстракт ослабленных патогенных микобактерий. В течение 3 последующих дней кожа в месте укола краснеет и слегка уплотняется, а также появляется припухлость — это является нормой. По диаметру воспаленного участка медработник определяет, инфицирован малыш или нет, сохраняется ли действие вакцины БМЖ, которая была проведена в первые дни жизни ребенка.
При отрицательной реакции Манту диаметр воспаленного участка не должен превышать 2 мм. Это свидетельствует о том, что малыш здоров и его организм не знаком с палочкой Коха. Положительным считается результат, если диаметр составляет 5 мм и более. При гиперергической пробе диаметр инфильтрации превышает 15 мм или на месте введения появляются эрозии, гнойники. В этом случае заражение туберкулезом очень вероятно, но в целом частота ложноположительных результатов при пробе Манту достаточно высока.
Диаметр кожной реакции 2-5 мм может свидетельствовать о нормальной пробе Манту у ребенка, недавно привитого от туберкулеза. Поэтому вероятность ложноположительного результата значительно усложняет диагностику.
Существуют и другие методы выявления туберкулеза, которые являются альтернативой Манту для детей. Чаще всего они применяются в качестве повторного исследования при сомнительном первом результате. Каждый из этих способов имеет свои плюсы и минусы, поэтому стоит заранее с ними ознакомиться.
Диаскинтест — особенности анализа
Диаскинтест — равноценная замена пробе МантуДанный метод был разработан в 2008 году. Он отличается высокой точностью, обладает почти стопроцентной чувствительностью к палочке Коха, что исключает вероятность ложноположительного результата.
Высокая точность теста достигается за счет того, что в составе вводимого препарата находится белок с двумя антигенами, присутствующими у микобактерий. Эти компоненты отсутствуют в вакцине БЦЖ, используемой для иммунизации детей первых дней жизни. Результат теста будет положительным только при наличии в организме ребенка возбудителя болезни.
Диаскинтест проводится детям с 8 до 18 лет ежегодно. Если малыш относится к группе риска по туберкулезу, допустимо проведение пробы 1 раз в 6 мес.
Основные симптомы, наличие которых может стать поводом для внепланового назначения теста:
- беспричинный длительный кашель;
- боль в ногах;
- общая слабость;
- усиленное потоотделение;
- нарушенный сон;
- сниженный аппетит;
- отсутствие концентрации внимания;
- резкое снижение веса;
- постоянная субфебрильная температура.
При проведении диаскинтеста препарат вводится под кожу, а по истечении 72 ч отслеживается реакция. В случае инфицирования в месте укола образуется папула розового цвета. Врач измеряет ее диаметр, а малыш дополнительно осматривается фтизиатром. На основании этого делается вывод о целесообразности специфической терапии.
Противопоказания к выполнению теста:
- индивидуальная непереносимость;
- соматические заболевания в период обострения;
- инфекции с лихорадкой;
- кожная патология в месте введения;
- эпилепсия;
- аллергия.
Тест не проводится в течение 1 мес. после вакцинации. Противопоказания к процедуре идентичные, как и в случае с пробой Манту. Дополнительной подготовки не требуется. Зачастую этим методом пользуются для уточнения результатов туберкулинового теста.
Квантифероновый тест, как вариант замены
Этот лабораторный метод позволяет выявить активную и скрытую инфекцию путем отслеживания в крови специфического интерферона, образующегося только при туберкулезе.
В России квантифероновый тест является вспомогательным исследованием при диагностике заболевания и проводится при наличии соответствующих показаний.
Во время анализа проводится забор крови у малыша. Тест определяет наличие в плазме гамма-интерферона, который вырабатывают лейкоциты при контакте организма с туберкулезной палочкой. Тест обладает высокой чувствительностью и специфиченостью.
Анализ в 6 раз точнее, чем кожные пробы, позволяет выявить и внелегочные формы болезни. К недостаткам можно отнести невозможность дифференцирования латентного течения, острого туберкулеза и инфицированности. Иногда возникают ложноположительные и ложноотрицательные результаты.
Наиболее распространенным методом диагностики туберкулеза считается проба Манту. Но в практику входят и другие тесты, способные выявить инфекцию на раннем этапе.
Все анализы не гарантируют стопроцентный результат, поэтому их стоит проводить поэтапно. Изначально делают Манту, в сомнительных случаях ее результат пересматривают по диаскинтесту, а для наиболее точной верификации рекомендуют провести исследование интерферона в крови. Только в таком случае можно подтвердить или опровергнуть вероятность инфицирования.
Если родители отказываются от проведения реакции Манту, ребенка могут не допустить к посещению детских учреждений, пока не будет предоставлена справка от фтизиатра об отсутствии туберкулеза. По рекомендации специалиста допустимо проведение альтернативного теста. По закону такие исследования назначает не педиатр, а фтизиатр.
Читайте в следующей статье: противопоказания манту
Альтернативы Манту для ребенка по закону: анализ крови, мочи и другие способы проверки вместо пробы на туберкулез
Туберкулез – серьезное инфекционное заболевание, которое может появиться у человека любого возраста. Возбудителем является микобактерия туберкулеза (палочка Коха).
Обязательная иммунизация вакциной БЦЖ новорожденных с последующей ревакцинацией значительно снизила заболеваемость туберкулезом. В настоящее время все чаще встречаются латентные формы болезни, поэтому проблема ранней диагностики не теряет своей актуальности.
Туберкулез передается от больного человека воздушно-капельным путем. У детей младшего возраста превалирует алиментарный путь заражения. Наиболее распространенным и дешевым методом раннего выявления болезни является проведение реакции Манту. Часто применяются и другие, альтернативные способы.
Основной метод профилактического обследования детей на туберкулез – реакция Манту, но при наличии противопоказаний и желании родителей можно провести альтернативные анализыПреимущества и недостатки пробы Манту
Пробой Манту называется метод исследования, при котором туберкулин вводится детям под кожу с внутренней стороны предплечья. Туберкулин не является вакциной, не содержит живую или инактивированную микобактерию туберкулеза.
Специфический иммунный ответ детского организма в виде папулы на коже вызывают продукты жизнедеятельности микобактерий. Проверка и оценка результата введения туберкулина производится через 72 часа, размер папулы измеряется прозрачной линейкой.
Согласно федеральным клиническим рекомендациям Российского общества фтизиатров выделяют несколько типов реакции:
- отрицательная реакция – папулы либо нет, либо ее размер менее 1 мм, ребенок никогда не контактировал с микобактериями туберкулеза;
- сомнительная реакция – до 5 мм в диаметре, не имеет диагностического значения;
- положительная реакция – уплотнение от 5 до 16 мм – первичный контакт с палочкой Коха состоялся, но болезнь не развилась;
- гиперергическая реакция – папула более 17 мм, гнойно-некротическое воспаление и увеличение регионарных лимфоузлов свидетельствуют о заболевании туберкулезом, требуется срочное обращение к врачу-фтизиатру.
Следует учитывать, что туберкулиновая проба может дать положительный результат не только при заболевании, но и после иммунизации БЦЖ.
Реакция Манту не дает представления о распространенности или локализации процесса. Помимо этого, достаточно велико количество ложноположительных результатов:
- при неправильном уходе за местом инъекции;
- при индивидуальной реакции организма малыша на вещества, содержащиеся в пробе, кроме туберкулина;
- при наличии массивной глистной инвазии.
Противопоказания к проведению Манту
Как и к любому методу диагностики, к проведению реакции Манту у детей имеется ряд противопоказаний:
- наличие серьезных поражений кожи, хронических болезней в момент манифестации, эпилепсии;
- аллергии во время обострения;
- индивидуальная гиперчувствительность к туберкулину;
- с момента выздоровления от последнего острого заболевания, либо после окончания карантинных мероприятий в детской организации, должно пройти не меньше месяца;
- проведение туберкулиновой пробы не рекомендуется в один день с плановой вакцинацией.
Альтернативные методы диагностики туберкулеза
Согласно федеральным клиническим рекомендациям Российского общества фтизиатров, с целью исключения туберкулеза у ребенка возможно использование альтернативных методов обследования. Заменить традиционные проверки могут следующие методики: Диаскинтест, Квантифероновый тест, Т-Спот исследование, обзорная рентгенография органов грудной клетки.
Анализы крови
Общеклинический анализ крови нельзя использовать вместо Манту. При заболевании туберкулезом в ОАК обнаруживается лейкоцитоз (увеличение количества лейкоцитов выше нормы), сдвиг лейкоцитарной формулы влево, увеличение скорости оседания эритроцитов (СОЭ).
Такие изменения не являются специфическими для туберкулеза, и происходят при любом воспалительном процессе в организме. Результаты биохимического анализа крови также будут без заметных изменений.
Исследование сыворотки крови способом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для скринингового обнаружения туберкулеза у детей не рекомендуется, поскольку выделить геномные фрагменты (части ДНК) возбудителей из крови возможно только при генерализованном туберкулезном процессе. Метод ПЦР пригоден для диагностических целей – выделения микобактерий туберкулеза в биологических образцах: мокроте, смывных водах бронхов, экссудате плевральной полости, спинномозговой и внутрисуставной жидкости. Использование ПЦР вместо проведения реакции Манту нецелесообразно.
Метод иммуноферментного анализа (ИФА) крови также не применяется при скрининге туберкулеза. Способ ИФА основан на обнаружении специфических антител в крови, а при туберкулезе действует другой патогенез иммунного ответа организма – антител в крови мало.
Анализ мочи
Анализ мочи также не является альтернативой туберкулиновым пробам, а лишь помогает в диагностике туберкулезного поражения мочевыводящей системы. В результатах исследования мочи можно обнаружить признаки амилоидных трансформаций только при внелегочных формах туберкулеза (изменения в почках, мочевом пузыре), а ПЦР мочи подтвердит диагноз.
Методика Диаскинтест
На сегодняшний день наибольшей восприимчивостью, избирательностью и минимальным аллергенным действием обладает проба с биопрепаратом «Диаскинтест». Он представляет собой аллерген туберкулезный рекомбинантный (АТР) и предназначается для внутридермального введения.
Методика инъекции и трактовка результатов аналогичны проведению пробы Манту, однако достоверность этого теста значительно выше. Тест считается положительным, если размер постинъекционной папулы превышает 3 мм. Крайне редко встречаются ложноположительные результаты при снижении у обследуемого общего иммунитета во время какого-либо сопутствующего заболевания.
Внутрикожный тест с АТР является единственной заменой проведения реакции с туберкулином по закону.
Метод квантиферонового теста
Для проведения квантиферонового теста придется сдать кровь из вены. Способ QuantiFERON – TB Gold основан на иммуносорбентном анализе определения специфических антител, продуцируемых Т-лимфоцитами, с помощью меченых ферментов.
Квантифероновый метод обладает высокой чувствительностью. Крайне высокая стоимость этого анализа исключает возможность широкого применения.
Т-Спот исследование
Т-спот метод (T-SPOT.TB, спот-реакция) не менее информативен, чем квантифероновый анализ. Главным отличием является определение самих Т-лимфоцитов, которые продуцируют антитела в ответ на внедрение микобактерий. Это исследование позволяет проверить пациентов, подлежащих диагностике, из группы повышенной угрозы по возникновению туберкулезной инфекции (например, ВИЧ-инфицированных).
Рентген грудной клетки
В качестве альтернативы пробы Манту можно провести рентген грудной клетки с последующей консультацией врача-фтизиатраСогласно Приказу Министерства Здравоохранения РФ № 951 2014 года возможно проведение рентгенологического исследования (обзорной рентгенограммы грудной клетки) для исключения заболевания туберкулезом. Рентгенография или КТ органов грудины также является альтернативой внутрикожным пробам и может использоваться вместо Манту. Однако необходимо помнить, что при использовании рентгенологического обследования организм ребенка получает достаточно вредную лучевую нагрузку.
Какой метод выбрать для ребенка вместо Манту?
Перед поступлением в детское дошкольное учреждение или школу, туберкулез должен быть исключен у абсолютно каждого ребенка согласно действующему законодательству. Основным методом скрининговой диагностики была и остается туберкулинодиагностика.
В федеральных клинических рекомендациях Российского общества фтизиатров четко прописан алгоритм ведения детей, поступающих (посещающих) в образовательные учреждения, в случае отказа от иммунодиагностики. По требованиям санитарно-эпидемиологических правил 3.1.2.3114-13 «Профилактика туберкулеза» дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась, допускаются в детскую образовательную организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутствии заболевания.
Следует помнить об опасности туберкулеза у детей, а также о том, что до сих пор не изобретен совершенно безопасный и абсолютно достоверный способ его диагностики. Именно поэтому ребенок должен быть обследован на туберкулез, а возможность выбора метода остается за родителями.
Врач-педиатр 2 категории, аллерголог-иммунолог, окончила БГМУ Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию. Подробнее »Поделитесь с друьями!